Los agonistas del receptor activado por proliferadores de peroxisomas alfa regulan de manera diferencial el inhibidor de la expresión de unión al ADN en roedores y células humanas

Estudio III. Ratones SV129 wild-type y ratones SV129 PPARα- null] fueron alimentados con una dieta suplementada con Wy-14,643 (WY) (0,1%) o di- (2-etilhexil) ftalato (DEHP) (0,6%), o una dieta control durante 3 semanas. WY y DEHP fueron seleccionados debido a su diferente propiedades estructurales y usos. DEHP se considera débil activador de PPAR en comparación con WY. En el momento designado después del tratamiento, los animales fueron anestesiados con pentobarbital inyección y asesinado por exanguinación.

Estudio IV. Las células de hepatocarcinoma humano (HepG2) se cultivaron en medios EMEM, suplementado con 1% de glutamina, 1% de amino no esencial ácidos, 3% antibióticos (100 U / mL de penicilina y 100 μL / mL estreptomicina) y suero bovino fetal al 10%. Después , las células se cultivaron en medio libre de suero (con 0.1% BSA) durante 24 horas y diferentes se agregaron diferentes concentraciones de fenofibrato (0, 10, 50 y 100 μM) en DMSO. Después de diferentes tiempos de incubación (2, 6 y 24 horas), se recogió el medio y las células se lavaron con hielo PBS y se recogieron con un raspador celular. Después de la centrifugación, los sedimentos celulares se congelaron y se usaron para la extracción de ARN. En en algunos casos, las células se preincubaron durante 30 minutos con el antagonista de PPARα MK-886 (10 μM) disuelto en DMSO. La concentración de DMSO en medio de cultivo no excedió 0.1%. Se llevó a cabo un experimento adicional en las mismas condiciones cono se describió anteriormente, pero las células fueron en su lugar cultivadas en medio libre de suero durante 36 horas y luego tratadas con drogas.